從天然產(chǎn)物中提取、分離活性成分并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾是當(dāng)前藥物研發(fā)的熱點(diǎn)之一。然而天然藥物因其具有成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)相近、含量較低等特點(diǎn)在研究開發(fā)過程中遇到了較大的困難，因此在藥物研究開發(fā)中有必要建立快速分離、分析天然活性成分的方法。
目前天然產(chǎn)物研究比較成熟的分析、分離方法有分光光度法、層析法、氣相色譜法、液相色譜法、高速逆流色譜等。但是這些方法對(duì)于對(duì)映體及類似物的分離、分析往往達(dá)不到理想的效果。而借助離子對(duì)技術(shù)可有效解決上述問題。本文就離子對(duì)色譜 技術(shù)、手性離子對(duì)技術(shù)在藥物檢測、分離中的應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述。
1、離子對(duì)色譜原理
離子對(duì)色譜法是將一種(或多種)與溶質(zhì)分子電荷相反的離子(稱為對(duì)離子)加到流動(dòng)相或固定相中，使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對(duì)化合物，從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。目前主要有正 相和反相離子對(duì)色譜法兩種類型。在正相離子對(duì)色譜中，含有離子對(duì)試劑的水溶液被涂漬到硅膠表面和孔隙中，流動(dòng)相是與水不相溶的有機(jī)溶劑。反相離子對(duì)色譜固定相絕大部分是化學(xué)鍵合的非極性表面固定相(如C18和C8)，操作簡便，分離柱效高，適合難以分離的酸堿、非離子混合物、核酸、核苷、生物堿以及藥物等的分離。
2、反相陽離子對(duì)試劑在藥物成分測定、分離中的應(yīng)用
反相離子對(duì)色譜的固定相為疏水型的中性填料，可用苯乙烯二乙烯苯樹脂或十八烷基硅膠(0DS 或C18)，用于陽離子分離的對(duì)離子是烷基磺酸類，如十二烷基磺酸鈉、己烷磺酸鈉，庚烷磺酸鈉等。 對(duì)離子的非極性端親脂極性端親水，其CH2鍵越長則離子對(duì)化合物在固定相的保留越強(qiáng)，在極性流動(dòng)相中，往往加入一些有機(jī)溶劑，以加快淋洗速度。 另外高氯酸、三氟乙酸也可與多種堿性樣品形成很強(qiáng)的離子對(duì)。近年來應(yīng)用反相離子對(duì)色譜技術(shù)進(jìn)行藥物活性成分含量測定、分離的文獻(xiàn)報(bào)道比比皆是，見表l、表2。
3、陰離子對(duì)試劑的應(yīng)用
反相離子對(duì)色譜用于陰離子、酸性物質(zhì)的分離 時(shí)常添加3～10 mm01·L-1陰離子對(duì)試劑使之形成中 性的離子對(duì)化合物，以增大在非極性固定相中溶解 度，從而使分離效果改善。常用的陰離子對(duì)試劑有 四丁基溴化銨、四丁基銨磷酸鹽、氫氧化四丁基銨、 氫氧化十六烷基三甲烷等。應(yīng)用陰離。
性離子對(duì)拆分藥物中的對(duì)映體，構(gòu)型不同的手性藥物分子其生理功能存在很大的差異。目前臨床上常用的1850多種藥物中有1045多種是手性藥物，如紫杉醇、青蒿素、沙丁胺醇和萘普生等。手性離子對(duì)技術(shù)在對(duì)映體的拆分中起著很大的作用。
反相離子對(duì)色譜、手性離子對(duì)技術(shù)作為一種較 新的檢測、分離手段在近年來得到了較廣泛的應(yīng) 用，特別是在藥物的分離檢測、對(duì)映體的拆分中發(fā) 揮了重要的作用。隨著m，LC的普及，新型手性柱、 手性離子對(duì)試劑廣泛應(yīng)用，相信在不久的將來，手 性對(duì)映體、微量藥物活性成分及類似物的分離將變得不再困難。
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